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1、清洁
清洁是指去除灰尘、污垢和有机污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤,或用浸泡肥皂水、清洁剂的湿布拖擦。粉尘、污物以及有机物是微生物的栖身之所,并可能影响除污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂、消毒剂)的作用。必须先经过清洁才能实现消毒和灭菌的目的,许多杀菌剂只对经过清洁过的物品才具有杀菌活性。清洁时必须使用与后续使用的消毒剂或杀菌剂化学性质上相容的试剂。
(1)清洁箱体表面:先拂去表面的灰尘,再用湿的海绵或软布清洗,再用软布擦干。如果有污物则用低浓度的清洁剂清洗,然后擦干。
(2)清洗箱体内部:选择合适的消毒剂。所有的物件表面必须彻底清洗,然后用无菌水冲洗,再擦干或晾干。
(3)清洗玻璃门:清洗箱内的玻璃门所用的清洁剂与清洗培养箱内部时使用的相同。然后用蒸馏水漂洗,从而清除残留的清洁剂,最后用软布把门擦干。
2、消毒和灭菌
消毒是指杀死微生物的物理或化学手段,但不一定杀死其孢子。灭菌是指杀死所有微生物,当培养箱内细胞受到污染时需采用灭菌措施。一般,在培养箱内细胞没有污染的情况下平均1-3个月彻底消毒一次。最常用的三种消毒灭菌的方式是:液体消毒剂、紫外和加热。
(1)液体消毒剂:选择对培养箱无腐蚀性的液体消毒剂。液体消毒剂的消毒效果好坏和很多因素有关,比如场所的温度、接触时间、pH、穿透能力、有机物的反应,这些因素中一些很小的变化可能造成去污效果的不同。因此液体去污剂不是完全可信赖的方法。
(2)紫外:一般先用蒸馏水清洗干净后,再用紫外灯照射(带紫外灯的培养箱)一天,或者用手提式的紫外灯照射。
(3)加热:湿热和干热被认为是杀菌最有效的方法。干热160℃-170℃、2-4小时在不具有渗透性、非有机体的物质(如玻璃)是可行的净化方法,但是甚至在有机体或非有机体的浅层也不能被绝缘。
除了以上几种方法外,还可同时使用几种消毒灭菌方法来达到彻底清洁的效果。
3、消毒注意事项
(1)不要使用强碱、强腐蚀性的试剂,以及含高含量次氯酸钠的漂白剂和消毒剂,虽然不锈钢有耐腐蚀性,但不是不受腐蚀。
(2)避免在二氧化碳传感器上喷洒清洗剂,清洗之前要使传感器充分冷却。一般清洗用的水是蒸馏水或去离子水,不能用自来水。
(3)挥发性的甲醛有毒、易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话,会影响细胞正常生长,甚至使细胞死亡。
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