3 、净化样品

当样品中含有对赛默飞色谱柱有损害的化学成分，如产生永久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质，以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。

4 避免过高的柱压

虽然高效液相色谱柱能耐受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ，但过高及过大的压力变化均会缩短赛默飞色谱柱的寿命，避免的方法是

(1)柱压过高时，尽可能采用较小的流速，以不超过柱最大允许压力的一半为宜。

(2)当流速较大时，应采取流速梯度的办法使流速分步到位。

(3) 使用手动进样阀时，进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时，柱切换要避免在高压下进行。

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