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目前我们都知道液相色谱柱的填料一般选择的是硅胶,但其实对硅胶填料的要求是有很多的,总结一下如下:
1、硅胶的纯度
2、硅胶类型
3、填料形状
4、填料的尺寸及尺寸分布
通常情况下,讨论色谱柱硅胶纯度用金属离子含量来讨论,一般建议硅胶填料中金属离子的含量越少越好。
因为硅胶表面的金属离子和硅醇基会导致化合物保留变大,这种二次保留效应会导致色谱柱色谱峰的拖尾。
金属离子的存在为什么会导致化合物的保留变大呢?
首先因为硅胶表面的金属离子会起鳌合作用,这样容易导致含有多个极性基团的化合物分子保留值变大。
其次,靠近表面的金属离子会激活硅醇基团,使得硅醇基更容易和酸性或碱性化合物相互作用,从而导致化合物保留值增大、色谱峰拖尾。
早期的时候,人们将作为填料的硅胶颗粒分成A类和B类两种硅胶。
其中A类硅胶带负电荷的残留硅羟基,而且酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa低),从而导致碱性化合物较易发生拖尾。
而B类硅胶由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合物不易发生拖尾。
而自1990以后用来制作色谱柱固定相填料的硅胶颗粒已经全部采用B型硅胶。
事实上针对硅胶表面的金属离子,供应商最有效的方案是进行酸洗。
有案例显示硅胶在化学改性前如用强酸处理,可以去除高达1/3的金属离子杂质。
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