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倒灌
左手拿接受容器, 右手拿供液容器。
1. 用火烧一下接受容器的开口,并且在火焰旁边保持一定的角度。
2. 用火烧一下供液容器的开口, 并在火焰上烧1 ~ 2秒,不要烧糊液体。
3. 将供液容器放在距接受容器上方2 英寸处, 并使二者成适当的夹角。
4. 倾斜瓶子并倒出溶液。
5. 倒完后用火分别烧一下两个瓶口。
由于倒淮比移液要更容易产生污染, 所以只有在转移大量的溶液时才使用倒灌这种操作。
过滤除菌
用注射式过滤器过滤少量溶液
材料
一次性0.2 μm 的滤器。
相应体积的注射器(1 ml 、2 ml 、5 ml 、10 ml 或20 ml, 50 ml 的注射器徒手操作比较困难),使用灭菌或一次性注射器。
使用无菌的管子作为接受容器。
试管架。
仅撕开滤器的上包装,即较粗的一端,可以插在注射器的顶端。
将注射器从包装中拿出,把推杆抽出,放置在清洁的台面。
将注射器顶端的保护头拿下,立即插在滤器上,注意不要把滤器拿出包装,把装好的装置放在清洁的台面。
将灭菌的管子打开盖子,放在试管架上。
将滤器从包装中拿出,放入试管中,拿住注射器,保持竖直状态。
将液体倒入注射器中,插回推杆,用力但要慢慢地使液体流经滤器后流入试管内。
将试管盖好,做好标签,将注射器丢弃到装有生物危害的尖利物垃圾箱内。
使用杯状滤器过滤大体积的溶液
材料
一次性0.2 μm 的滤器。
放置滤器的铁架台或架子。
无菌的试剂瓶用来装过滤后的溶液。
真空器,实验台上见到的家用真空泵是最常用的设备,这种设备是用水或泵驱动的。
将冲器和真空泵用软管相连,滤器用夹子固定在架子上,保持竖直和稳定。
将溶液倒入滤器,溶液体积大时可以分批次将液体倒入滤器。
将滤器的盖子盖上,缓慢打开真空泵,溶液会慢慢地从滤器中抽出来。有些滤器可以配上尤菌的试剂瓶,这样过滤后的溶液可直接存放在试剂瓶中。
关闭真空泵,等待一会。
从滤器上拔下真空泵的管子,立刻将过滤好的液体倒入一个无菌的试剂瓶保存。如果容器是过滤装置的一部分时,只需先把容器的盖子盖好。
试剂瓶上做好标签,注明已经过滤除菌(FS) ,弃掉滤器。
抽气操作
使用抽气移出液体的操作和使用移液器的操作十分类似,同样要收拾好工作区间,但要多出一个容器用来临时放置用过的移液管或吸管。
打开移液管或巴氏管的包装,安装一个到抽气瓶上。
用左手拿住吸管,插入右手拿的橡皮管中。
用手握住插入橡皮管的吸管部分。
如果是玻璃的吸管用火稍微的烧一下。
打开真空泵。
打开要吸取液体的试管或容器,同样用右手剩余的两个手指夹住盖子,并把试管或容器保持45℃
用火焰烧一下试管口。
把吸管头刚好插入液面以下,并随着液面的下降而下降。
快到底部时,稍微抬起一点吸管,使吸管头在沉淀上方附近缓慢移动,直至吸完,但不要碰到沉淀。
将吸管放入事先准备好的容器,以便处理。
将容器口烧一下,盖好。
将容器或试管竖直放置,确认液体已经吸完。
关闭真空泵,取下吸管。
使用抽气操作有传染性的物质时,必须在抽滤瓶和真空装胃之间接上一个盛水的滤器,可以防止那些物质进入真空装置中。当真空度降低时,说明滤器已经被浸湿,必须更换,所以要事先准备好备用的滤器。
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