1、参加有机相之后再丈量活动相的PH值通常情况下丈量活动相的PH值,是丈量水相中的PH值参数。有机相参加之后PH值参数的丈量就和之前有误差。PS:但假如能确保每次丈量都是参加相同量的有机相之后得到的PH值,虽然这不能确保精确度,可是这能确保前后一致的丈量结果,所以这样也没有问题。
2、不运用缓冲盐缓冲盐的参加是用来操控和批改活动相中PH值的改动的。样品基质、空气中的CO2、水中的杂质都会形成活动相PH值的改动,而PH值的改动会影响样品的保存、峰形、峰面积参数。
3、没有在正确的缓冲区间运用缓冲盐每个缓冲盐都有必定的缓冲范围,在此范围内它供给了最佳的pH稳定性。在这个范围外,缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以要么在正确的范围内运用缓冲盐,要么选择一个缓冲范围覆盖所需pH值的缓冲盐。
4、向有机相中参加缓冲盐假如将水相的缓冲溶液参加到有机相中,会大大添加缓冲盐分出的危险。缓冲盐的分出在初期或许并不明显,但会对仪器的各个部件都会产生必定影响。(延伸阅读:做完样品记得移除体系中的缓冲盐哦!)
5、梯度洗脱时直接用泵去混合活动相而且活动相份额从0%开端现在的液相色谱能够十分高效的进行在线脱气和活动相混合。可是将梯度洗脱份额从0%开端,会有比较大的呈现气泡和沉积的危险。(延伸阅读:深度剖析等度洗脱和梯度洗脱的适用范围和办法设置)
6、没有运用正确的pH值润饰酸或碱作为缓冲液缓冲溶液的润饰酸或碱,只运用生成缓冲盐的酸或碱。例如,磷酸钠缓冲液只能用磷酸或氢氧化钠调理。
7、没有在办法中阐明缓冲液的全部信息例如只在办法中写“称5克磷酸钠溶入1000毫升水”。缓冲盐的类型决议其pH缓冲范围,而缓冲盐中所需物质的浓度决议了缓冲强度。例如:5g的无水磷酸钠和5g的一水磷酸钠具有不同的缓冲强度,会影响保存率。
8、运用仪器时不调查之前运用的活动相情况,直接用纯有机溶剂冲体系假如之前的办法在B通道运用缓冲溶液,而这次没有经过调查就直接在B通道运用了纯的有机溶剂,那么就会形成该通道缓冲盐分出、呈现阻塞等危险。
9、将溶剂瓶中的活动相用干为止溶剂瓶中的活动相假如用干,会导致仪器中呈现气泡等问题。
10、仅运用超声来给活动相脱气超声脱气有必定的脱气作用,但彻底脱气的效果并不理想。所以在此建议运用真空脱气机进行在线脱气。
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