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荧光分析可以根据物质光致发光产生的荧光特性和强度,对物质进行定性和定量分析。目前,它还被广泛用于表征体系的物理化学性质和变化,如生物大分子的构象和性质。荧光光谱适用于固体粉末、晶体、薄膜、液体等样品的分析。可根据样品选择石英反应杯(液体样品)或固体样品架(粉末或片状样品)。
荧光分析的优点:
(1)高灵敏度
(2)强选择性
(3)小样本量
(4)提供更多的物理参数
(5)易于使用。但是,它也有一些缺点,如应用范围不够,对环境敏感(干扰因素较多)。
1.定性分析
不同结构的荧光化合物具有特征的激发和发射光谱。因此,可以将荧光物质的激发和发射光谱的形状和峰位与标准溶液的光谱进行比较,从而达到定性分析的目的。
2.定量分析
在低浓度下,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度成正比:F=KC。式中,f为荧光强度,C为荧光物质浓度,K为比例系数。这是荧光光谱定量分析的基础。
荧光光谱在生物领域的应用:
荧光光谱法主要用于生物样品中某些组分含量的测定,生物技术和免疫技术的分析,如脱氧核糖和脱氧核糖核酸的测定,以及DNA、抗体、抗原等的研究。各种荧光探针用于分析和检测。主要分为生物纳米荧光探针和生物非纳米荧光探针。纳米技术的兴起开辟了荧光分析的新领域。纳米材料具有良好的荧光、宽激发、窄发射等优良的光谱特性,是荧光分析领域研究人员十分感兴趣的重要研究对象。
荧光光谱在药物分析中的应用:
在药物分析领域,荧光光谱可用于药物活性成分的鉴定、药代动力学研究、临床药理疗效分析等。药物荧光分析可分为直接荧光分析、间接荧光分析和纳米荧光分析。常规荧光分析首次用于分析抗疟药物奎宁。随着荧光分析技术的发展,它被广泛应用于抗生素、镇痛药、镇静剂和止血剂的分析。
荧光光谱在食品中的应用:
荧光分析主要应用于该领域,分析检测矿物质和金属元素、氨基酸、维生素、真菌污染、添加剂、防腐剂、食品包装中的有害物质、农药残留等,结合HPLC、TLC、FIA等技术,可以提高食品中各种物质的检测方向。
荧光光谱在环境分析中的应用:
随着有机化工、石油化工、医药工业的发展,以及农药(农药、除草剂等)的广泛使用,有机化合物的危害越来越大,对环境的污染越来越严重。荧光分析可用于检测环境中各种物质的含量,主要用于水、矿石和土壤。
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