3.CO2 零点飘移监控:CO2培养箱使用过程中, CO2 气压零点会发生自然飘移现象, 这种现象不能在箱面气体显示框中表现出来, 实验者也不易觉察到飘移结果细胞培养液颜色变化异常、细胞生长缓慢甚至死亡。CO2 气压零点是否飘移, 可通过CO2 气体测试仪, 取箱内气体检查确定。如我们测试了6 台细胞培养箱, 它们的显示值都为5 %, 测试结果为2 台箱内外气压值一致, 其余4 台中箱内气压值最高18 %, 最低0 .5 %, 这些异常气压值培养箱影响了细胞实验结果。因此, 实验室应建立CO2 气压零点测试制度, 通常每3 个月进行1 次, 以保证CO2气压实际使用值的正确。
4.培养箱饱和湿度监控: CO2 培养箱使用过程中, 要求在箱内托盘中放一定量的灭菌水(3/ 2 至全盘), 使箱内为饱和湿度环境, 这是针对开放培养细胞要求设计的。因为饱和湿度环境可以避免培养液中CO2 逃逸, 培养液中pH 值稳定, 有利于细胞生长。实际使用过程中, 实验者常忘记补加水, 使培养细胞处于低湿度甚至干热环境中, 培养液CO2 气体易挥发, 液体pH 值升高, 影响细胞生长。为避免此问题发生, 我们采用箱面大字警告和值日生负责制相结合的方法, 能较好地落实这一措施。此外, 针对CO2 培养箱内湿热环境易滋生细菌等问题, 我们采用在1 000ml 水中加2ml 新洁尔灭液, 定期用酒精和紫外线消毒箱内空气, 培养物酒精擦拭入箱内, 以减少箱内微生物滋生速度。实验多时, 箱内分区存放, 培养物用筐或瓷盘存放, 这样存取快速, 缩短开门时间, 减少箱内气体和湿度变化, 节省气体,稳定了细胞生长环境。
综上所述, 在CO2培养箱使用过程中, 只要做好室温、湿度和CO2 气压零点测试纠正工作, 就能保证CO2 培养箱正常运行, 使它真正成为培养细胞舒适的摇蓝。
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