液相色谱检测器常用的一般以下几种:
1、紫外可见检测器
紫外可见光检测器是应用最广泛的检测器,遵循的原理是郎伯比尔定律。
紫外可见检测器灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱分离。该检测器要求被检测样品组分有紫外-可见光吸收,而使用的流动相无吸收,或在被测组分吸收波长处无吸收。一般选择在待分析物最大吸收波长处进行检测,以获得最高灵敏度和抗干扰能力。在没有最大吸收时,可采用末端吸收。检测波长的选择除取决于待测物质的成分和分子结构外,还必须考虑流动相组成、共存组分干扰等因素。特别是各种溶剂都有一定的透过波长下限值,超过这个波长,溶剂的吸收会变得很强,以至于不能很好地测出待测物质的吸收强度。
2、光电二极管阵列检测器(Photodiode Array Detector)
简称PDA,又称为二极管阵列检测器(DAD)。这种检测器以光电二极管阵列作为检测元件,可进行多通道并行检测,在一次色谱测量中,可同时获得时间、波长、吸光度三者的关系,通过计算机处理,在荧光屏上显示出三维图谱,也可作出任意波长的吸光度-时间曲线和任意时间的吸光度-波长曲线。
3、示差折光检测器
示差折光检测器是一种通用型检测器。基于连续测定液相色谱色谱柱流出物光折射率的变化而用于测定溶质浓度,溶液的光折射率是溶剂流动相和溶质各自的折射率乘以其物质的量浓度之和,溶有样品的流动相和流动相本身之间光折射率之差即表示样品在流动相中浓度。
原则上,凡是与流动相光折射率有差别的样品都可用它来测定,其检测限可达(10^-6~10^-7)g/ml。应注意的是,选择溶剂时必须考虑溶剂的光折射率。但这种检测器灵敏度低,对温度、流动相组成等的变化敏感,而且与梯度洗脱不相容,很大程度地限制了它的应用范围。在药物分析中,这种检测器多用于多糖类、萜类化合物等分子量和含量的测定。
4、荧光检测器(Fluorescence Detector)
荧光检测器是基于化合物的光致发光现象,荧光检测器流通池为直角形的试样池,用石英材料制成。这一检测器特别适用于痕量组分和能显示荧光的物质检测。这种检测器具有极高的灵敏度和良好的选择性。一般来说,它比紫外吸收检测器的灵敏度要高10-1000倍,可达μg/L级,而且需要的试样很少,因此在药物和生化分析中有着广泛的应用。
5、蒸发光散射检测器(ELSD)
蒸发光散射检测器是一种新型的通用型质量检测器,不同于紫外和荧光检测器,ELSD的响应不依赖于样品的光学特性,任何挥发性低于流动相的样品均能被检测,不受其官能团的影响。ELSD检测过程主要分为三个步骤:首先是雾化过程,用惰性气体或净化空气将色谱柱流出物雾化;第二步是蒸发过程,流动相在加热管(漂移管)中蒸发;第三步是检测,测定留下来的样品颗粒的光散射。
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