高效液相色谱仪的三大保养要点
和其它分析仪器一样,若想让高效液相色谱仪很好地为你工作,首先要保养好它,总结保养的三要点:脱气、过滤和冲洗。
一、脱气
流动相脱气对于避免HPLC系统出问题、顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。常用的脱气方法有如下几种:
1、吹氦脱气法:
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。
2、加热回流法:
此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。
3、抽真空脱气法:
此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4、在线脱气法:
现在商品的HPLC仪器,均可配在线脱气机,在线脱气使用简单,低故障,有效。
二、过滤
任何颗粒物进入HPLC系统后都会在柱子入口端被筛板挡住,最后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此,要采取各种预防措施,努力防止或减少颗粒物进入HPLC系统中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并提高数据的可靠性。
三、冲洗
使HPLC系统良好运行的第三个要点是保持系统的清洁。以下几个部位需要经常冲洗。
1、流动相储液瓶
首先要经常清洗流动相储液瓶,或者每做一批新样品更换一次流动相。一个脏的储液瓶将会污染注入的流动相。建议储液瓶中缓冲液使用时间不要超过一周,而有机溶剂使用时间不要超过一个月。
2、泵
接下来要冲洗的是泵。千万不要一分析完冲几分钟后就停泵,在停泵以前一定要用非缓冲液流动相冲洗泵在半个小时以上,要是流动相中有难挥发缓冲盐则建议冲洗的时间应该更长些。
3、自动进样器
自动进样器也要按规定清洗。现在的仪器多配有自动进样器的冲洗液瓶,通常只要注意及时更换、补充冲洗液即可。
4、色谱柱
对柱子的污染是随使用时间而增加。用梯度冲洗效果更好,具体的比例要根据柱子的说明书和性质而定。
5、检测器
如果是正常使用,检测器将依据其性质并按照说明书规定进行洗。