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高效液相色谱中常见的峰形畸变

2023-11-22 14:29:36 集思仪器

在使用液相色谱仪时,经常会出现峰形畸变的情况。接下来就让我们一起来看看,如何才能避免峰形失真。

高效液相色谱仪

当检测器因样品过载时会出现平顶峰响应。在这种情况下,检测器的灵敏度要高得多,并且会饱和以产生宽阔的平顶峰。一种选择是衰减信号响应(不是实际的解决方案),因为其他峰的检测也会受到影响。更可行的选择是降低样品浓度或进样量。

峰拖尾是由于表面硅烷醇基团电离为- Si-O -提供阳离子交换位点而引起的常见失真。解决方案在于使用高纯度级硅胶载体以及推荐的pH值范围2-8。

缓冲液控制添加剂的使用也限制了硅胶表面上硅烷醇基团的电离。添加剂如三氟乙酸(TFA)是一种离子配对剂,有助于抑制电离。浓度范围为10-25 mM的缓冲液添加剂足以满足大多数应用的需求。

通过过滤流动相溶剂、使用入口过滤器和更换泵密封件,在它们开始磨损和释放垃圾颗粒之前,可以防止筛板堵塞或空隙形成。

低纯度二氧化硅通常含有促进硅烷醇基团电离的金属杂质。由于与固定相中的金属离子螯合,使用高纯度硅胶固定相有助于拖尾。

与峰拖尾相比,峰前移不太常见

通常由于色谱柱内的沟道而导致峰前移。最好更换色谱柱或以其他方式在推荐的pH范围内操作。

色谱柱过载也会导致峰前移。使用稀释样品或减少进样量。

流动相与样品的不相容性通常会导致峰前移。将样品溶解在流动相或其他兼容溶剂中

肩峰和分裂峰通常是由于两种未分离的化合物的存在造成的。

减少样品量或使用稀释溶液通常可以解决分裂问题

峰的分裂也是由玻璃料堵塞引起的。使用20–30 ml流动相的反向流动通常可以解决峰分裂问题。

更换堵塞的筛板或保护柱

当由于存在两种接近洗脱的化合物而导致分裂时,请在进样前进行样品净化

果你还有任何关于液相色谱仪的问题,欢迎联系集思仪器,免费咨询热线:027-85518521,400-0027-510,17720504339。

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