1、准备。将高压灭菌锅放在2000瓦电炉上，或放在有足够火力的煤气灶、煤炉上，向锅内加水至水位标记线为止。将准备灭菌的培养基及空玻璃器皿用牛皮纸包好，装入锅内套层中，物品放置不宜过多，过挤，锅内应留出三分之一空间。然后盖严锅盖，采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋， 关闭锅盖上的气阀。

2、加热。点燃热源，开始加热。当锅盖上的压力表达到0.5kg/c㎡时，打开放气阀，排净锅内冷空气，直到压力表回降到“0”时，关闭气阀，继 续加热。当压力表上升到所需压力时（一般为1kg/c㎡），开始计算灭菌时间。此时应适当关小热源，不断调节热源大小，使压力始终维持在所需数值上，达 到保压时间后，停止加热，使高压灭菌锅内压力自然下降。

3、结束。待压力表降至“0”时，拧松螺旋，半开锅盖，用锅内余热烘干盖纸，10分钟后取出灭菌物品。

高压灭菌锅注意事项

1、锅外水壶水位线的检查，要使其介于最高线和最低线的中间位置偏下为宜。以免在灭菌过程中有过热的水和水蒸气溢出，造成危险。

2、每次打开高压灭菌锅前要确保温度在80℃以下和压强为0。

3、灭菌用水必须用RO水/单蒸水，以免灭菌锅内积水垢。

4、在拿出篮子时要尽量保持篮子清洁，以防被污染。

5、如在灭菌过程出现问题，按STOP键，转到制冷系统，中止操作。

6、灭菌过后要检查好电源是否断开，整理好方可离开。

7、如隔1个月左右不用，需将锅内水排掉，清洗灭菌锅。

8、在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气，锅内冷空气如排放不净，会影响灭菌效果，达不到彻底灭菌的目的。

9、由于高压灭菌锅灭菌时，要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。

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