液相色谱是打开未知物质世界的大门。科研中的很多问题都能在色谱图中很好地反映出来。有些问题可以通过改变设备参数来解决，而有些问题必须通过操作程序来修改。毕竟，选择合适的色谱柱和流动相是获得良好色谱的关键。

在液相色谱分离过程中，我们经常会遇到六个常见的问题。每一个问题都可以通过使用适当的方法来开发策略和工具来避免。

一、峰尾

1.屏幕被挡住了

如果色谱柱两端的滤网堵塞，样品会在筛板中堵塞形成延迟，样品在柱后流出时峰形会形成尾部。可以通过反吹塔或更换筛板来解决。

2.折叠列

是指色谱柱因其他原因失去柱效，无法保留物质，使物质不停留在固定相上，随流动相流出，但仍有一点柱效，从而形成拖尾。可以通过重新加载或替换列来解决。

3.污染

样本不在同一条起跑线上，从后面跑到最后，露出尾巴。更换色谱柱或用有机溶剂梯度冲洗色谱柱1小时以上即可解决。

4.流动相PH值选择错误

如果某些样品在一定的pH值下，分子型和离子型之间存在动态平衡，那么离子型会逐渐向分子型呈现拖尾。调节pH值可以抑制分子解离，改善拖尾现象。对于碱性化合物，相对较低的pH值更有利于获得对称的峰。

二、高峰前

1.样本过载

保留的样品在正常峰前持续释放，形成前峰，从而降低样品含量。

2.溶剂选择不当

当样品溶剂的洗脱能力远强于流动相时，会出现峰锋。例如，反相色谱中使用腈作为样品溶剂时，流动相的洗脱能力较弱。峰锋会出现。这个问题可以通过选择流动相或相似比例的流动相作为样品溶剂来解决。

3.立柱损坏

柱效损失，无物料滞留。只能通过更换色谱柱来解决。

4.一个小峰出现在大峰之前，也就是想象中的锋峰。即小峰埋在大峰之前，可以通过调节流动相的洗脱梯度来解决。

第三，基线漂移

1.柱温波动

即使很小的温度变化也会引起基线波动，这通常会影响差分探测器、电导探测器、低灵敏度紫外探测器或其他光电探测器。可以通过使用柱温箱和在检测器前使用热交换器来控制柱温度和流动相的温度来解决。

2.不均匀流动相

条件变化引起的基线漂移大于温度引起的基线漂移。可以用HPLC级溶剂解决，流动相使用前要脱气。

3.流动池被污染或有气体

用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流动池。如有必要，使用1N硝酸(不要使用盐酸)。4.流量比或流量变化不当

比例或流量。为避免此问题，请定期检查流动相的成分和流速。

5.样本中有强烈的保留意见

芋头峰以逐渐增加的基线形式洗脱。这可以通过使用保护柱来解决。如有必要，在进样之间或分析过程中，定期用强溶剂清洗色谱柱。

第四，更宽的山峰

1.由于色谱柱污染或失效，塔板数减少：更换相同类型的新色谱柱。如果新色谱柱提供对称的峰，用强溶剂清洗旧色谱柱。

2.色谱柱与检测器之间的管道过长或管道内径过大：更换内径较小的短管道。

3.检测器对反应时间或池体积的过度响应可以通过缩短响应时间或使用更小的流动池来解决。

五.基线噪音

1.流动相、检测器或泵中有空气(尖峰):确保对流动相进行脱气，并冲洗系统以去除检测器或泵中的空气。

2.泄漏：检查管接头是否松动，泵是否泄漏，是否有盐析和异响。如有必要，更换泵密封件。

3.流动相混合不完全：用手或使用低粘度溶剂充分混合。

4.温度影响(柱温过高或检测器未加热):使用柱温箱降低温差或增加换热器。

5.同一线路上的其他电子设备(意外噪音):断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自外部，并进行校正。使用精密稳压电源。

第六，决议不够充分

1.流动相梯度洗脱设置不合理：优化梯度洗脱程序。

2.流动相污染或变质(导致保留时间改变):重新配置流动相。

3.保护柱或分析柱堵塞：取下保护柱进行分析，必要时更换；如果分析柱堵塞，可以进行反冲洗；如果问题持续存在，色谱柱可能会被强烈残留的污染物损坏。再生计划；如果问题仍然存在，可能是入口堵塞。尝试更换入口处的滤网或更换色谱柱。

武汉集思仪器设备有限公司致力于打造世界先进水平又适合国内的实验室设备，致力于为您度身定制系统的实验室整体解决方案，是华中地区规模型实验室服务一站式供应商，已为超过5000个国内知名企事业单位提供专业实验室仪器设备，咨询热线：027-85518521，400-0027-510，17720504339。