凝胶成像系统构成及选型
实验室常用到的凝胶成像系统的构成有哪些呢?
认识CCD
CCD是电荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名称缩写,是一种光电转换器件。是凝胶图像系统的核心部件。
CCD又分为:制冷型和非制冷型,在曝光超过5-10秒,CCD芯片就会发热,没有致冷设备的芯片,“热”或者白的像素点就会遮盖图像,图像到处可见雪花。
衡量CCD好坏的指标:分辨率,CCD尺寸,动态范围,灵敏度,量子效率,信噪比等,CCD感光器件的面积越大,捕获的光子越多,感光性能越好,信噪比越低 。
关键参数指标
分辨率:和像素相关,像素为CCD能分别的最小的感光元件 ,即为一个点。CCD与像素数量和像素大小也有关。
动态范围值:动态范围表示在一个图像中最亮与最暗的比值。灰阶12(bit)表示在一种表征光亮度的方法 ,动态范围的值越高CCD性能越好。
量子效率:(CCD分为 商业及、工程级、科研及。)波长越大效率越高。CCD的量子效率也称像素灵敏度,指在一定的曝光量下,像素势阱中所积累的电荷数与入射到像素表面上的光子数之比。
信噪比:化学发光检测的时候,需要曝光的时间比较长,这样导致CCD产生较多的暗电流,对图像的质量影响非常大。需要通过CCD降温来减少影响
光学镜头:光学镜头从焦距上可分为短焦镜头、中焦镜头,长焦镜头;从视场大小分有广角、标准,远摄镜头;结构上分有固定光圈定焦镜头,手动光圈定焦镜头,自动光圈定焦镜头,手动变焦镜头、自动变焦镜头,自动光圈电动变焦镜头,电动三可变(光圈、焦距、聚焦均可变)镜头等。
滤光镜片:荧光:gelred、gelgreen、EB、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Red、SYPRO Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、荧光板等
滤光轮
作用:滤掉不需要的光,只让特定波长的光透过。
DNA分子在紫外光下,会发出590nm左右的荧光。因此应用F590滤光片,就会只让DNA分子发出的光透过滤光片被相机检测到。而紫外透照仪发出302nm UV不会被相机检测到。
其他部分
不锈钢暗室:抗化学腐蚀,密闭
透照台:一般是抽屉式透照台,方便进行切胶(透射面积:Xcm X Ycm)
紫外自动防护装置:开门自动关闭光源
光源:紫外透射和白光反射,可选配白光透射(紫外/白光转换屏)
05如何选型
1、根据应用范围:选择普通凝胶成像或高端应用的化学发光和荧光系列成像系统
2、根据像素要求选择:50万,140万,200万,420万等
3、根据暗箱类型选择
4、根据紫外透射面积选择
5、根据镜头类型选择:手动镜头,电动镜头
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