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凝胶成像仪的应用范围及操作流程

2023-05-06 09:26:38 

从整体总的来说凝胶成像(系统)可应用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。

梅洁专业型凝胶成像仪,操作方便、简单、快速

应用范围

分子量定量

对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNA Marker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。

密度定量

一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PA GE蛋白胶条带的浓度测定。

密度扫描

在分子生物学和生物工程研究中,我们最常用到的是对蛋白表达产物占整个菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法就是利用专用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的凝胶成像就能完成此项工作。

PCR定量

PCR定量主要是指,如果PCR实验扩增出来的条带不是一条,那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言,与密度扫描类似,但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数,密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。

操作流程

1.打开暗箱门,放胶于相应的透照台(紫外观测核酸胶;白光观测蛋白胶).

2.关暗箱门,鼠标点开屏幕上Bio-capt图标。

3.按凝胶仪箱体上部照明灯开关,使处于开启状态。

4.鼠标点击屏幕右上角的“Realtime"操作框,调整好凝胶的摆放位置。

5.关闭前述照明灯,打开右下角右侧透照台总开关,选择左侧分开关至相应的紫外或白光透照台。

6.鼠标点击屏幕右侧"Realtime"下方“Intergrationtime"操作框,调整其下的滚动标至适当的位置,使图像更清晰。

7.感觉图像满意后,点击"Freeze”冻结并保存图像。

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