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在线脱气在高效液相色谱中的应用

2023-05-04 08:46:20 

在线脱气的定义在线脱气即是仪器运行过程中,由脱气泵对流动相进行脱气处理。

高效液相色谱仪简介

高效液相色谱运行所需要的基本组成为液相色谱仪和流动相。高效液相色谱仪(HPLC)由泵、进样器、柱温箱、检测器四部分组成。泵可分为单泵、双泵、四元泵;进样器从功能上可简单的分为自动进样器和手动进样器;检测器在HPLC中,常用的有单波长紫外检测器、二极管阵列紫外检测器和质谱检测器。一般流动相在仪器运行过程中会依次经过泵、进样器、柱温箱和检测器。

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气泡生的来源

在液相色谱对有机物分析过程,由于有机物在各类型色谱柱中保留特性的不同,我们需要使用不同比例的流动相作为洗脱剂对样品进行分离洗脱,从而达到化合物的分离和纯化。常用流动相有甲醇、乙腈和水,根据实验需要往往需要用到甲醇-水洗脱体系、乙腈-水甚至甲醇-乙腈-水体系,一般来说,液相色谱使用的各种流动相液体中都会含有不同溶解量的气体,当温度升高、剧烈震动、压力下降等情况下容易产生气泡;另外还有一种情况是,当两种不同的溶剂混合时,热力学体积发生变化,会引起气泡的产生,尤其在梯度变化过程中;此外,在单泵使用中,常常需要甲醇与水的切换使用,在吸滤头表面往往会有较多的气泡溢出。

气泡效液相色谱仪检测的危害

由于气体的可压缩性,在气泡进入到泵内,而滞留情况下,会导致系统压力波动和流速不稳;同时,当气泡进入色谱柱时,引起所分析的样品与色谱柱填料作用位点减少,故而使样品保留时间等产生影响;气泡进入检测器会使谱图出现鬼峰和杂峰、基线漂移等,影响测定结果,如果混入气体含有氧气,其与待测样品某些基团反应,产生荧光淬灭现象,可能会造成灵敏度下降或者不出峰;此外,系统中的气体尤其是氧气会与色谱柱某些填料反应,引起柱效降低,使色谱柱使用寿命缩短,因此,在线脱气对于液相色谱来说十分重要。

减少气泡仪器危害的其他方法

那该如何避免气泡所产生的这些影响呢?除上述所说的在线脱气外,在有条件的情况下,我们可以对含水溶液进行超声脱气处理,一般超声5-10 min即可;还有在实验过程中,避免环境温度产生较大的变化,定期清洗流动相吸滤头或者更换。

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